Contribuição ao estudo da etiopatogenia das lesões hepáticas em ovinos associadas ao consumo de Brachiaria decumbens

Abstract

Nove ovinos foram submetidos ao pastoreio continuado sobre pastagens de Brachiaria decumbens, onde detectou-se, praticamente, a ausência de esporos de Pithomyces chartarum. Aos 89 dias do período experimental, um animal desenvolveu sinais clínicos de fotossensibilização que incluíram edema da cabeça e dos membros, espessamento, vermelhidão e ressecamento das orelhas. Este animal foi o único a apresentar elevação dos níveis séricos de у glutamil transferase (GGT). À necropsia, todos animais apresentaram fígados com áreas esbranquiçadas de distribuição multifocal disseminados na superfície diafragmática. Os exames das seções histológicas dos fígados de todos animais revelaram o mesmo padrão de alterações e incluíram colangite multifocal marcada nas tríades portais com proliferação de duetos biliares e infiltração de macrófagos e linfócitos. Cristàis foram observados no interior dos duetos biliares ou próximos a estes, circundados por macrófagos. Através da microscopia eletrônica, estas estruturas cristalóides foram também constatadas no interior de macrófagos e hepatócitos. Outros cinco ovinos foram dosados com extratos fracionados de Brachiaria decumbens proveniente do potreiro experimental, tendo sido utilizadas as frações aquosa e diclorometano, sob dosagens entre 20 e 75 g/dia e durante um período de 3 a 18 dias. Nenhum destes ovinos desenvolveu fotossensibilização, entretanto, 4 apresentaram lesões macroscópicas e todos tiveram lesões microscópicas idênticas às observadas nos animais mantidos na pastagem de B. decumbens. Através de ressonância magnética de próton e carbono (RMN 1 H e 13 C), identificou-se uma mistura de diosgenina e iamogenina nas amostras da planta. Nas amostras de conteúdos ruminais dos ovinos mantidos no potreiro de Brachiaria decumbens foram identificadas epismilagenina, episarsasapogenina e uma mistura de esmilagenina e sarsapogenina através de espectros de RMN (1 H e 13 C) e espectros de massa (EI-MS). Além disto, a análise por CCD demonstrou dois compostos compatíveis com epismilagenina e episarsapogenina nas amostras de bile destes ovinos. Através destes mesmos métodos, saponinas e seus derivados não foram encontrados nas amostras dos animais controles, os quais em ambas as etapas experimentais, também não apresentaram alterações macroscópicas ou histológicas.

Nine lambs were kept grazing pure pastures of Brachiaria decumbens. Spore counts were performed on pasture samples, by "wash method", twice a week and revealed nearly absence of Pithomyces chartarum spores. Only one animal showed clinicai signs of photosensitization, which included edema of the head and limbs, swelling, reddening and cracking of the ears. Elevation of the GGT activity was observed only in the photosensitized sheep. At necropsy, ali B. decumbens-grazed animais presented livers with whitish spots of multifocal distribution scattered throughout the parenchyma, especially on the diaphragmatic surface. Upon histological examinations of the hepatic sections, all lambs revealed the same pattern of alterations, which included marked multifocal cholangitis in the portal triads with bile duct proliferation and infiltration of macrophages and lymphocytes. Crystals were observed within the hepatocytes, macrophages, bile ducts or surrounded by macrophages. Fractioned extracts of Brachiaria decumbens were administered to additional five lambs. Were utilised the aqueous and the dichloromethane fractions, at dosages from 20 to 75 g/day, throughout a period of 3 to 18 days. Although photosensitization was not observed, 4 lambs presented gross lesions and ali 5 animais had microscopic lesions identical to those observed in the animais maintained on pastures of B. decumbens. The analysis of the Brachiaria decumbens samples by NMR (1 H e 13 C), revealed a mixture of diosgenin and yamogenin. In the rumen contents samples from the B. decumbens-grazing group were identified by TLC, 1 H e 13 C NMR and EI-MS epismilagenin, episarsasapogenin, and a mixture of smilagenin and sarsasapogenin. In the bile samples from the B. decumbens-grazing group, TLC analysis demonstred two compounds similar to epismilagenin and episarsasapogenin. However, by this same method, those compounds were not observed in the samples from the lambs which served as control animais.