Avaliação dos efeitos do cloridrato de ropivacaína no endotélio corneano de equinos utilizando a microscopia eletrônica de varredura : estudo in vitro

Abstract

Objetivou-se avaliar os efeitos agudos do cloridrato de ropivacaína no endotélio da córnea de equinos saudáveis. Vinte e seis córneas de 13 cavalos, machos ou fêmeas, de diferentes idades e provenientes de abatedouro comercial licenciado foram aleatoriamente divididas em três grupos compostos por 13 córneas cada. Grupo A: o endotélio da córnea foi exposto ao cloridrato de ropivacaína a 0,75% por 60 segundos, e o endotélio da córnea do grupo B foi exposto ao cloridrato de ropivacaína a 0,75% por 15 minutos. Grupo C: o endotélio da córnea foi exposto à solução salina balanceada por 60 segundos. Após todas as amostras foram lavadas com solução salina balanceada. As córneas então foram excisadas com trépano de 8mm e preparadas para avaliação com microscopia eletrônica de varredura. Foram obtidas eletromicrofias aleatórias de cada amostra. As imagens foram analisadas e com auxílio de um software as áreas com ausência de células endoteliais foram mensuradas. Foram descritas as somas das áreas em percentagem para cada tratamento (A, B e C) pela média, mediana, desvio padrão, mínimo e máximo. Foi avaliada a distribuição das variáveis pelo teste de Shapiro-Wilk que apontou distribuição não normal. Foi utilizado para a comparação da soma das áreas entre os tratamentos o teste de Friedman. O teste de Wilcoxon foi utilizado para detectar as diferenças e o seu valor de P foi corrigido pelo teste de Bonferroni, devido às comparações múltiplas realizadas. Foi considerado um nível de significância de 5% para as comparações estabelecidas. A média da perda endotelial, expressas em percentual em relação à área total, das amostras do grupo A foi 5,28%. A média da perda endotelial das amostras do grupo B, expressas em percentual em relação à área total, foi 20,39%. O dano no endotélio da córnea foi significativamente maior no grupo B comparativamente ao grupo A e C. Com base nos resultados apresentados foi possível concluir que o cloridrato de ropivacaína a 0,75% induziu dano agudo nas células do endotélio da córnea de equinos.

The aim of the study was to investigate the acute effects of ropivacaine chlorhydrate on the corneal endothelium of healthy equines. Twenty-six corneas from 13 horses, males and females, of different ages, acquired from a licensed commercial slaughterhouse were randomly divided into three groups (13 corneas each). Group A: the corneal endothelium was exposed to ropivacaine chlorhydrate at 0.70% during 60 seconds. Group B: the corneal endothelium was exposed to ropivacaine chlorhydrate at 0.75% during 15 minutes. Group C: the corneal endothelium was exposed to a balanced saline solution during 60 seconds. Each sample was washed with a balanced saline solution. Corneas were excised with an 8mm surgical drill bit and prepared for scanning electron microscopy. Electromicrographies were collected at random from each sample. Images were analyzed using a specific software and regions lacking endothelial cells were measured. Total of areas was described for each treatment (A, B and C) through percentage, mean, median, standard deviation, minimum and maximum. The distribution of variables was evaluated through the Shapiro-Wilk test, which unraveled a non-normal distribution. The Friedman test was applied in order to compare the sum of the areas between treatments. The Wilcoxon test was used to detect significant differences and, due to multiple comparisons, its p-value was corrected by Bonferroni post-hoc test. A significance level of 5% was considered significant for the set comparisons. The average endothelial loss of samples, expressed in percentage in relation to the total area, was 5.28% and 20.39% for groups A and B, respectively. The corneal endothelium damage was significantly higher in group B, when compared to both groups A and C. Based on the present results it is possible to infer that ropivacaine chlorhydrate at 0.75% induces acute damage in corneal endothelial cells of equines.