Une nouvelle catégorie de filaments de 3-4 nm du cytosquelette de l'oeuf et du muscle lisse d'échinodermes : biochimie, immunocytochimie et ultrastructure

Abstract

Le travail présenté dans cette thèse a permis la caractérisation de protéines appartenant d'une part au cytosquelette des cellules du muscle lisse de l'intestin de deux échinodermes, Paracentrotus lividus et Holothuria tubulosa, ainsi que d'autre part à la cytomatrice de l'oeuf non fécondé de P. lividus. Nous avons démontré par des techniques biochimiques, immunocytochimiques et ultrastructurales que les muscles lisses de ces invertébrés marins ne présentent pas de filaments de type intermédiaire. Par contre, nous avons mis en évidence l'existence d'un réseau constitué d'une nouvelle catégorie de filaments de 3-4 nm de diamètre qui forment, avec les protéines contractiles, le cytosquelette de ces cellules. Dans le muscle lisse de P. lividus, nous démontrons que des protéines de 54000-56000 daltons sont associées à ces filaments de 3-4nm. Cependant dans le muscle lisse de H. tubulosa, l'absence de réaction croisée avec l'anticorps dirigé contre les protéines de 54000-56000 daltons de l'oursin indique une grande spécificité d'espèce en ce qui concerne les protéines constituant ces réseaux de filaments. La présence de ces protéines de cellules musculaires a également été mise en évidence dans l'oeuf de P. lividus. La cytomatrice de l'oeuf non fécondé contient un réseau cortical de filaments de 3-4 nm semblable à celui de la cellule musculaire. Nos résultats suggèrent que les protéines de 54000- 56000 daltons sont associées aux filaments de 3-4 nm et nous proposons que ces filaments participent au cytosquelette de l'oeuf d'oursin non fécondé.

This work reports the characterization of some of the cytoskeletal proteins from two echinoderms (Paracentrotus lividus and Holothuria tubulosa) smooth muscle cells, as well as from the non fertilized P. lividus egg cytomatrix. Biochemical, immunocytochemical and ultrastructural studies show that 10nm filaments are absent in these cytoskeletons. However, in these structures, evidences are presented showing the presence of a novel type of network made of 3-4 nm filaments. Immunogold electron microscopy reveals that two cytoskeletal proteins of 54 and 56 Kd are constituents of these filaments in the Paracentrotus lividus smooth muscle and in the egg cytomatrix. These filaments were named echinonematin filaments. The proteins constituents of the 3-4 nm filaments from Holothuria tubulosa smooth muscle do not cross react with the anti-serum prepared against the two proteins from sea urchin. We propose that these 3-4 nm filaments might play the role of intermediate filaments in the organization and fonction of the cytoskeleton of these two echinoderms smooth muscles.