Desenvolvimento de metodologia analítica para quantificação e avaliação de incidência de antiparasitários em ovos por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas tandem

Abstract

Os medicamentos veterinários podem ser utilizados como ferramentas para auxiliar no incremento da produção de avicultura de postura. Uma das classes de medicamentos utilizada é dos antiparasitários. O manuseio deve ser realizado de forma correta já que resíduos em alimentos oferecem riscos à saúde pública. No Brasil, é publicado anualmente o Plano Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes com os Limites Máximos de Resíduos definidos para cada composto químico e a respectiva matriz. Os objetivos desse trabalho são avaliar diferentes variáveis no preparo de amostra a fim de selecionar as condições que proporcionem a obtenção de uma metodologia eficiência e prática. Comprovar o desempenho da metodologia proposta. E por fim, avaliar a incidência de antiparasitários em amostras de ovos coletadas em algumas regiões do Brasil. O planejamento fatorial completo e fracionado foi utilizado para as otimizações realizadas. A metodologia desenvolvida consiste na extração de 2 gramas de amostras com 10 mL de acetonitrila (dividida em duas porções de 2,5 mL e uma de 5,0 mL), agitação por 20 min, adição de 1g de cloreto de sódio para o salting out, nova agitação por 10 min, centrifugação, 30 minutos de purificação a baixa temperatura, evaporação a 50ºC com fluxo de nitrogênio e ressuspensão em acetonitrila para a análise por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em modo tandem. Dentre os antiparasitários analisados alguns metabólitos também foram incluídos. Foi avaliada a incidência do Albendazol, Albendazol sulfona, Albendazol sulfóxido, Albendazol ciclopentil, Albendazol ciclopentil sulfona, Albendazol ciclopentil sulfóxido, Albendazol amino sulfona, Febendazol, Febendazol sulfona, Febendazol sulfóxido, Fipronil, Fipronil sulfona, Abamectina, Doramectina, Eprinomectina, Flubendazol, Ivermectina, Levamisol, Monensina, Moxidectina, Mebendazol, Oxibendazol, Praziquantel e Sisapronil. A metodologia analítica foi utilizada na análise de 348 amostras de ovos as quais foram coletas pelo Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Metade das amostras apresentou quantificação e37amostras apresentaram não conformidades (concentrações acima do limite de decisão (CC𝛼)). O Albendazol apresentou mais não conformidades, 30 amostras. Em segundo lugar, o Fipronil em 11 amostras. E o Mebendazol em uma amostra. A presença de não conformidade xvi para mais de um composto foi identificada em 5 amostras. O Albendazol e oFipronilforam quantificados por seu resíduo marcador sulfona em todas as amostras. Por fim, a metodologia analítica para a determinação de antiparasitários em ovos atendeu aos critérios de validação, além de ter poucas etapas, ser eficiente e confiável. A partir do monitoramento das amostras, observa-se a necessidade de uma análise multirresiduos, e também, ressalta-se a importância do monitoramento de metabólitos, já que, os medicamentos utilizados sofrem reações de metabolização, e podem ser totalmente convertidos após a administração.

Veterinary medicine can be used as tools to help increase production of laying poultry. One of the classes of medicines used is the antiparasitics. The manipulation must be carried out correctly, residues in foods offer public health risks. In Brazil, the National Plan for the Control of Residues and Contaminants is published annually with the Maximum Residue Limits for each chemical compound and matrix. The objectives of this work are to evaluate different variables in sample preparation, in order to select the conditions that provide obtaining an efficient and practical methodology. Prove the performance of proposed methodology. Besides, the last goal is to evaluate the incidence of antiparasitics in eggs samples collected in Brazil. The complete and fractional factorial design was used for the optimizations performed. The development methodology consists in the extraction of 2 g of sample with 10 mL of acetonitrile (divided into two portions of 2,5 mL and other of 5,0 mL), shaking for 20 min, addition of 1g of sodium chlorite to salting out, a new shaking for 10 min, centrifugation, 30 min of low temperature purification, evaporation at 50ºC with nitrogen flow and resumption with acetonitrile for analysis by liquid chromatography couple tandem mass spectrometry. Among the antiparasitics analyzed, some metabolites were also included. It was evaluated the incidence of Albendazole, Albendazole sulfone, Albendazole sulfoxide, Albendazole cyclopentyl, Albendazole cyclopentyl sulfone, Albendazole cyclopentyl sulfoxide, Albendazole amino sulfone, Febendazole, Febendazole sulfone, Febendazol sulfoxide, Fipronil, Fipronil sulfone, Abamectin, Doramectin, Eprinomectin, Flubendazole, Ivermectin, Levamisol, Monensin, Moxidectin, Mebendazole, Oxibendazole, Praziquantel e Sisapronil. The methodology was used to analysis 348 eggs samples, which gathering was made by Federal Inspection service of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply. Half of the samples gathered presented quantifications and 37 samples presented non compliance (concentration above the limit decision (CC𝛼)). The Albendazole was the antiparasitic that presented more non compliance: 30 samples. In second and third place were taken by Fipronil (11 samples) and the Mebendazole (1 sample), respectively. The non compliance presence for more than one compound was xviii observed in 5 samples. The Albendazole and Fipronil were quantified in all samples by their marker residues sulfone. Finally, the analytical methodology to the determination of antiparasitics in eggs is suitable, besides being few steps, efficiently and reliably. From the samples monitoring, the importance of a multiresidue analysis has been observed, and also, the importance of monitoring metabolites is emphasized, since that the medicines used suffer metabolic reactions, and can be fully converted after administration.