Avaliação da microbiota intestinal e suas alterações em pacientes adultos de transplante de células tronco hematopoiéticas alogênico de um hospital do sul do Brasil

Abstract

O transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH) é um procedimento complexo utilizado para tratar diversas doenças hematológicas malignas ou benignas. Requer um condicionamento com quimioterapia acompanhada ou não de radioterapia e, frequentemente, uso de antibióticos. Pode resultar em toxicidade, infecções e doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Diversos estudos demonstram que há uma diminuição na diversidade da microbiota intestinal associada a desfechos negativos nesse contexto. Entretanto, existem poucos dados acerca da população brasileira. Portanto, o objetivo desse trabalho foi caracterizar a microbiota intestinal antes e depois do TCTH alogênico em uma amostra de pacientes adultos de um hospital público no sul do Brasil, e relaciona-la com desfechos pós-transplante como infecção, DECH e mortalidade. O projeto teve a aprovação no Comitê de Ética em Pesquisa do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (CAAE 54679321.7.0000.5327). Participaram do estudo 15 pacientes (8 homens e 7 mulheres), submetidos ao TCTH alogênico pela primeira vez, que produziram 21 amostras de fezes viáveis para análise. A avaliação da microbiota intestinal foi realizada a partir de amostras fecais coletadas antes do condicionamento e após a enxertia, das quais extraiu-se o DNA. A partir disto, a região V4 do gene 16S rRNA foi amplificada seguida de sequenciamento no equipamento Ion S5™. Os resultados deste trabalho estão apresentados na forma de artigo de acordo com o regimento do Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas da Universidade Federal do Rio Grande do Sul. De maneira geral, os resultados das análises da diversidade alfa e beta demonstraram diferenças significativas entre as amostras pré e pós-transplante. Confirmou-se que há um desequilíbrio na composição da microbiota intestinal após o TCTH com a redução de bactérias importantes para a saúde e aumento de bactérias potencialmente patogênicas. Além disso, foi encontrada associação da microbiota intestinal com DECH aguda.

Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is a complex procedure used to treat several malignant or benign hematological diseases and requires conditioning with high-dose chemotherapy, accompanied or not by radiotherapy and use of antibiotics. It can result in toxicity, infections, and graft-versus-host disease (GVHD). Several studies demonstrate that there is a decrease in the diversity of the intestinal microbiota associated to negative outcomes in this context. However, there is little data on this in the Brazilian population. Therefore, the objective of this work was to characterize the intestinal microbiota before and after allogeneic HSCT in a sample of adult patients from a public hospital in southern Brazil and relate it to post-transplant outcomes such as infection, GVHD and mortality.The project was approved by the Research Ethics Committee of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (CAAE 54679321.7.0000.5327). The study included 15 patients (8 men and 7 women), undergoing allogeneic HSCT for the first time, who produced 21 viable stool samples for analysis. The evaluation of the intestinal microbiota was carried out using fecal samples collected in preconditioning period and after grafting, from which DNA was extracted. From this, the V4 region of the 16S rRNA gene was amplified followed by sequencing on the Ion S5™ equipment. The results of this work are presented in the form of an article in accordance with the regulations of the Post-Graduate Program in Medical Sciences at Universidade Federal do Rio Grande do Sul. In general, the results of alpha and beta diversity analyze demonstrated significant differences between pre- and post-transplant samples. It was confirmed that there is an imbalance in the composition of the intestinal microbiota after HSCT with a reduction in bacteria important for health and an increase in potentially pathogenic bacteria. Furthermore, an association between intestinal microbiota and acute GVHD was found.