Clonagem de dois genes de quitina sintase de Magnaporthe oryzae em vetor para a transformação de arroz
dc.contributor.advisor | Margis, Rogerio | pt_BR |
dc.contributor.author | Fonseca, Guilherme Cordenonsi da | pt_BR |
dc.date.accessioned | 2024-05-12T06:42:18Z | pt_BR |
dc.date.issued | 2008 | pt_BR |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10183/275355 | pt_BR |
dc.description.abstract | O arroz (Oryza sativa) é uma planta de grande importância alimentar sendo o alimento básico da dieta de mais da metade da população mundial. O fungo Magnaporthe oryzae é o patógeno responsável pela doença brusone do arroz que causa graves prejuízos a cultura dessa planta. A quitina é um dos principais polissacarídeos constituintes da parede celular dos fungos e é muito importante para a sua viabilidade. A quitina sintase é a enzima que polimeriza esse polissacarídeo e existem até sete classes dessa proteína em fungos. O presente trabalho buscou a construção de um vetor para a transformação de arroz que produza moléculas de dupla fita de RNA (dsRNA) correspondentes à parte da seqüência do produto de dois genes da quitina sintase de M. oryzae com o objetivo de tornar a planta resistente a esse fungo ao desencadear o processo de interferência por RNA (RNAi). Como alvos para o silenciamento gênico por RNAi foram utilizados os genes das quitinas sintases de classe I e III. Para a obtenção dos fragmentos dos genes da quitina sintase e para a construção do vetor foram delineados oligonucleotídeos para a amplificação de parte desses dois genes. Com o objetivo de ordenar os dois fragmentos em tandem foi utilizada uma região de seqüência comum entre os genes para a delineação do oligonucleotídeo reverse de um gene e Foward do outro. O RNA total do fungo foi extraído e posteriormente foi sintetizado o cDNA utilizando o oligonucleotídeo T25V. Os fragmentos foram então amplificados utilizando os oligonucleotídeos específicos de cada gene. Os produtos dessa reação foram utilizados juntos em uma nova reação de PCR para a formação da seqüência em tandem. Esse fragmento foi então inserido no vetor pENTR-D/TOPO e posteriormente recombinado no pANDA que é específico para a produção de moléculas de dsRNA. | pt_BR |
dc.format.mimetype | application/pdf | pt_BR |
dc.language.iso | por | pt_BR |
dc.rights | Open Access | en |
dc.subject | Clonagem | pt_BR |
dc.subject | Arroz | pt_BR |
dc.subject | Fungos | pt_BR |
dc.title | Clonagem de dois genes de quitina sintase de Magnaporthe oryzae em vetor para a transformação de arroz | pt_BR |
dc.type | Trabalho de conclusão de graduação | pt_BR |
dc.identifier.nrb | 000679871 | pt_BR |
dc.degree.grantor | Universidade Federal do Rio Grande do Sul | pt_BR |
dc.degree.department | Instituto de Biociências | pt_BR |
dc.degree.local | Porto Alegre, BR-RS | pt_BR |
dc.degree.date | 2008 | pt_BR |
dc.degree.graduation | Ciências Biológicas: Ênfase Molecular, Celular e Funcional: Bacharelado | pt_BR |
dc.degree.level | graduação | pt_BR |
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TCC Ciências Biológicas (1355)