Desenvolvimento e validação de método analítico aplicando Quality by Design na avaliação enantiomérica da rivaroxabana

Abstract

A rivaroxabana (RIV) é um fármaco pertencente à classe dos novos anticoagulantes orais, o qual age inibindo o fator X ativado (FXa) da cascata de coagulação, tendo como indicações profilaxia de trombose venosa profunda após cirurgia de reposição de quadril ou joelho, embolia pulmonar e sistêmica, prevenção de derrame e, mais recentemente, utilizada em pacientes com COVID-19, devido as complicações geradas por esta infecção. Essa molécula possui um centro quiral, mas apenas o enantiômero (S)-rivaroxabana (S-RIV) apresenta atividade farmacológica, sendo (R)-rivaroxabana (R-RIV) considerada uma impureza. O controle de qualidade tem como principal objetivo a garantia da segurança e da eficácia, tanto de produtos farmacêuticos quanto dos insumos ativos, sendo a análise de impurezas uma etapa necessária para assegurar estes fins. O Quality by Design (QbD) é um modelo fundamental de qualidade farmacêutico sendo utilizado no desenvolvimento de produtos e processos. No presente trabalho foi desenvolvido e validado um método por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em fase quiral para separação enantiomérica da RIV. Para o planejamento experimental foi aplicada a abordagem QbD utilizando o software MODDE® 13 (Sartorius, Alemanha), com o qual, desenvolveu-se um método analítico que empregou uma coluna Chiralpak® AD-RH, fase móvel constituída de mistura de acetonitrila (ACN): água (92:8 v/v), com vazão de 0,35 mL/min, temperatura de 40 ºC, detecção a 250 nm e tempo total de análise de 12 minutos. Os parâmetros de adequabilidade do sistema ficaram dentro das faixas de aceitação, e obteve-se uma resolução de 1,6 entre os enantiômeros. O método foi validado de acordo com as especificações contidas nas guias oficiais e na legislação vigente, abrangendo os seguintes parâmetros analíticos: seletividade, linearidade, precisão, exatidão e robustez. Os limites de detecção (LD) e quantificação (LQ) obtidos para S-RIV foram 0,20 μg/mL e 0,68 μg/mL e para R-RIV foram 0,30 μg/mL e 1,0 μg/mL, respectivamente. O método proposto demonstrou ser confiável e exequível, podendo ser aplicado para o controle de qualidade de matéria-prima e preparações farmacêuticas contendo RIV.

Rivaroxaban (RIV) is a drug of the class of new oral anticoagulants which acts by inhibiting the activated factor X (FXa) of the coagulation cascade having as indications prophylaxis of deep vein thrombosis after hip or knee replacement surgery, prevetion of stroke, pulmonary and systemic embolism and currently also used in patients with COVID-19 due to complications of this infection. This molecule has a chiral center but only the enantiomer (S)-Rivaroxaban (S-RIV) presents pharmacological activity being (R)-Rivaroxaban (R-RIV) an impurity. Quality control has as main objective the guarantee of safety and efficacy of both pharmaceutical products and active inputs and the analysis of impurities is a necessary step to ensure these objectives. Quality by Design (QbD) is a fundamental model of pharmaceutical quality used in the development of products and processes. In the present work a high-performance liquid chromatography (HPLC) method was developed and validated for enantiomeric separation of RIV. For experimental planning the QbD approach was applied using the MODDE® 13 software (Sartorius, Germany) with which an analytical method was developed using a Chiralpak® AD-RH column and a mobile phase consisting of acetonitrile (ACN) mixture: water (92:8 v/v) with flow of 0.35 mL/min, temperature of 40 ºC, detection at 250 nm and total running time of 12 minutes. The system suitability parameters were within the acceptance ranges and a resolution of 1.6 was obtaining among the enantiomers. The method was validated according to the specifications contained in the official guides and current legislation covering the analytical parameters: selectivity, linearity, precision, accuracy, and robustness. The limits of detection (LOD) and quantification (LOQ) obtained for S-RIV were 0.20 μg/mL and 0.68 μg/mL and for R-RIV were 0.30 μg/mL and 1.0 μg/mL respectively. The proposed method proved to be reliable and feasible and can be applied to quality control of raw material and pharmaceutical preparations containing RIV.