Controle de qualidade das determinações laboratoriais do ensaio clínico randomizado LINDA-Brasil

Abstract

Introdução: Estudos multicêntricos longitudinais devem monitorar a qualidade das mensurações ao longo do tempo e manter a comparabilidade entre os diferentes centros de investigação. Medidas acuradas e precisas são importantes para aumentar o poder estatístico em testes de associações. Adotar um laboratório central e avaliar a reprodutibilidade pode ajudar a garantir a confiabilidade dos resultados de exames laboratoriais. Objetivos: Avaliar a reprodutibilidade dos resultados das medidas repetidas de exames laboratoriais que definem o Diabetes Mellitus, desfecho principal do Estudo LINDA-Brasil, e descrever os procedimentos de garantia de qualidade adotados no laboratório central, com ênfase nos aspectos relacionados à glicose plasmática, hemoglobina glicada (HbA1C) e insulina. Métodos: Foram utilizadas as medidas laboratoriais da linha de base do estudo LINDABrasil, coletadas entre 2015 e 2021, em 6 centros de diferentes cidades do Brasil. Para cada exame um subgrupo foi selecionado ao acaso do conjunto de participantes e coletada uma amostra adicional de sangue para duplicação de um dos exames. Amostras de plasma, sangue total e soro, original e repetição, foram encaminhadas ao Laboratório do Serviço de Diagnóstico Laboratorial (SDL) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) para dosagem de glicose, HbA1c e insulina. A reprodutibilidade dos resultados foi avaliada através do coeficiente de correlação intraclasse (CCI) e do Coeficiente de Variação (CV). Os gráficos Bland-Altman foram utilizados para explorar a concordância entre as 2 repetições de cada exame. Resultados: O número de replicatas de controle de qualidade obtidas para cada analito variou entre 62 para glicose 2 horas e 68 para insulina 1 hora e para HbA1c, representando 8,7% e 9,5% respectivamente do total das participantes da linha de base do estudo (n=710). Os resultados de CCI para a maioria dos analitos ficaram acima de 0,98 exceto para insulina jejum (CCI=0,95; IC95%=0,85-0,98) e insulina 1 hora (CCI=0,92; IC95%=0,72-0,99). A variabilidade em relação à média ficou dentro dos valores desejados, com CVs variando de 1,71% (glicose em jejum) a 17,07% (insulina 1 hora). Os gráficos Bland-Altman confirmaram a concordância entre as medidas, não sendo observadas tendências de associação entre a magnitude da diferença e a amplitude dos valores. Conclusão: As análises demostraram que os resultados das medidas laboratoriais do estudo LINDA-Brasil são confiáveis. A utilização de protocolos padronizados produz boa qualidade 9 da coleta, processamento e transporte das amostras biológicas. A centralização das análises bioquímicas em um laboratório de referência se mostrou uma estratégia eficiente para garantir a confiabilidade dos resultados.

Introduction: Longitudinal multicenter studies should monitor the quality of measurements over time and maintain comparability between different research centers. Accurate and precise measurements are important to increase statistical power in association tests. Adopting a central laboratory and evaluating reproducibility can help ensure the reliability of laboratory test results. Objectives: To evaluate the reproducibility of the results of repeated measurements of laboratory tests that define Diabetes Mellitus, the main outcome of the LINDA-Brazil Study, and to describe the quality assurance procedures adopted in the central laboratory, with emphasis on aspects related to plasma glucose, hemoglobin glycated ( HbA1C ) and insulin. Methods: Baseline laboratory measurements from the LINDA-Brazil study were used collected between 2015 and 2021, in 6 centers in different cities in Brazil. For each exam, a subgroup was randomly selected from the set of participants and an additional blood sample was collected for duplication of one of the exams. Original and repeat plasma, whole blood and serum samples were sent to the Laboratory of the Laboratory Diagnostic Service (SDL) of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) for glucose, HbA1c and insulin measurements. The reproducibility of the results was evaluated using the intraclass correlation coefficient (ICC) and the Coefficient of Variation (CV). Bland-Altman plots were used to explore the agreement between the 2 repetitions of each exam. Results: The number of quality control replicates obtained for each analyte ranged from 62 for 2-hour glucose and 68 for 1-hour insulin and HbA1c, representing 8.7% and 9.5% respectively, of the total number of baseline study participants (n=710). The ICC results for most analytes were above 0.98 except for fasting insulin (CCI=0.95; 95%CI=0.85-0.98) and 1-hour insulin (CCI=0.92; 95%CI =0.72-0.99). The variability in relation to the mean was within the desired values, with CVs ranging from 1.71% (fasting glucose) to 17.07% (insulin 1 hour). The Bland-Altman graphs confirmed the agreement between the measurements, with no trends of association between the magnitude of the difference and the amplitude of the values being observed. Conclusion: The analyzes showed that the results of the laboratory measurements of the LINDA-Brazil study are reliable. The use of standardized protocols produces good quality in the collection, processing and transport of biological samples. The centralization of biochemical analyzes in a reference laboratory proved to be an efficient strategy to guarantee the reliability of the results.