Avaliação dos efeitos antitumoral e anti-inflamatório do extrato bruto e das frações purificadas bioativas de Uncaria tomentosa (Wild) DC. em modelos experimentais de câncer de bexiga e de cistite hemorrágica

Abstract

A bexiga é um órgão constantemente exposto a compostos tóxicos provenientes do metabolismo, cuja exposição crônica pode levar a diversas patologias quando não tratada adequadamente. A cistite hemorrágica é uma condição inflamatória generalizada da bexiga caracterizada por eventos inflamatórios intensos e normalmente associada ao uso de fármacos antineoplásicos como a ciclofosfamida. Para a prevenção da ocorrência da cistite hemorrágica o fármaco 2-mercaptoetanosulfonato de sódio (Mesna) tem sido utilizado, apesar deste composto não ser eficiente em lesões já estabelecidas. Em relação ao câncer de bexiga, este é caracterizado como sendo a segunda neoplasia mais comum do trato genitourinário e o sétimo câncer mais prevalente entre homens no mundo. O tratamento varia conforme a natureza invasiva do tumor, sendo que para a prevenção da recorrência deste câncer, quimioterapia ou imunoterapia adjuvante têm sido utilizadas. Contudo, a administração intravesical de BCG é o tratamento mais efetivo do câncer de bexiga superficial, porém apresenta inúmeros efeitos colaterais, onde aproximadamente um terço dos pacientes progridem para um estágio superior. Tanto a cistite hemorrágica quanto o câncer de bexiga permanecem como desafios terapêuticos, uma vez que a eficácia dos tratamentos muitas vezes, é insuficiente. Na busca de novos tratamentos, pesquisas tentam encontrar compostos a partir de plantas medicinais com baixa toxicidade. Neste contexto, a Uncaria tomentosa merece destaque, uma vez que cascas e raízes da espécie são amplamente empregadas na medicina popular para inúmeras enfermidades, como doenças do trato urinário e câncer. Considerando estes dados, o objetivo deste estudo foi investigar o efeito do extrato bruto hidroetanólico e das frações purificadas de alcalóides oxindólidos e de glicosídeos do ácido quinóvico da planta Uncaria tomentosa sobre a proliferação de células tumorais de bexiga e sobre um modelo de cistite hemorrágica em camundongos. Demonstramos no Capítulo 1 que a fração purificada de glicosídeos do ácido quinóvico foi capaz de inibir o crescimento e a viabilidade celular das linhagens de câncer de bexiga humano T24 e RT4. Na linhagem T24, esta fração induziu significativamente a apoptose pela inibição da ciclooxigenase 2, sem causar parada no ciclo celular. Embora mais investigações sejam necessárias, hipotetizamos que esta inibição possa estar ocorrendo via inibição do fator de transcrição NF-κB. No Capítulo 2, demonstramos que esta mesma fração purificada foi capaz de promover uma redução significativa no edema e no peso das bexigas dos animais previamente tratados com este composto, demonstrando atividade equivalente à Mesna. Assim como para os experimentos in vitro, nos experimentos in vivo, supomos que a reversão dos danos induzidos pela ciclofosfamida, provavelmente esteja associada à capacidade desta fração em inibir a ativação do fator de transcrição NF-κB, o qual poderia estar agindo de modo a prevenir os efeitos colaterais provocados pela ciclofosfamida. A partir dos resultados obtidos, fica evidente que esta investigação demonstra promissoras propriedades antitumoral e anti-inflamatória para a fração purificada de glicosídeos do ácido quinóvico podendo, no futuro, se tornar um agente terapêutico potencial no tratamento destas patologias da bexiga.

The bladder is an organ constantly exposed to toxic compounds from the metabolism, whose chronic exposure can lead to various diseases, if not appropriately treated. Hemorrhagic cystitis is an inflammatory condition of bladder characterized by intense inflammatory events associated with the use of anticancer drugs such as cyclophosphamide. To prevent the occurrence of hemorrhagic cystitis sodium 2- mercaptoethanesulfonate (Mesna) has been used, although this compound is not effective in established lesions. Regarding bladder cancer, this is characterized as the second most common malignancy of the genitourinary tract and the seventh more prevalent cancer among men in the world. The treatment depends on tumor invasiveness. To prevent recurrence of bladder cancer, adjuvant chemotherapy or immunotherapy has been used. However, the intravesical administration of BCG is the most effective treatment of superficial bladder cancer. Nevertheless, many side effects are common and approximately one third of cancer cases progress to higher stage. So, both hemorrhagic cystitis and bladder cancer remain like therapeutic challenges, since the effectiveness of treatment is often insufficient. In the search for new treatments, researches have been trying to find compounds from medicinal plants with low toxicity. In this context, Uncaria tomentosa is noteworthy, since barks and roots of this species are widely used in folk medicine for numerous diseases such as urinary tract disease and cancer. Considering these data, the objective of this study was to investigate the effect of crude extract hydroethanolic and purified fractions of Uncaria tomentosa on the proliferation of bladder cancer cells and on a model of hemorrhagic cystitis in mice. We demonstrated in the Chapter 1, that the quinovic acid glycoside purified fraction was able to inhibit the growth and viability of T24 and RT4 human bladder cancer cells. In T24 cells, this fraction significantly induced apoptosis by inhibition of cyclooxygenase 2, without causing cell cycle arrest. Although further investigations are necessary, we hypothesized that this effect may be occurring by inhibition of the transcription factor NF-κB. In the Chapter 2, we demonstrated that the same purified fraction was able to promote a significant reduction on edema and weight of mice bladders, showing activity equivalent to Mesna. In these experiments, we assume that the reversal effect of the damage induced by cyclophosphamide probably is related to the ability of this fraction to inhibit the activation of the transcription factor NF-κB, which could be acting to prevent the side effects caused by cyclophosphamide. Considering these results, it is evident that this research shows promising antitumor and anti-inflammatory properties for the quinovic acid glycosides purified fraction, which may in future, become a potential therapeutic agent in treatment of bladder diseases.