Análise química e efeito de baccharis trimera na proliferação e morte celular em linhagens humanas de carcinoma cervical e de câncer de mama

Abstract

O câncer de mama e o câncer de colo de útero são dois grandes problemas de saúde pública no mundo. Apesar do aumento de diagnósticos de câncer, os tratamentos medicamentosos disponíveis têm eficácia variável, possibilidade de recidiva e muitos efeitos colaterais. Considerando a importância das plantas como fontes de novos fármacos, é importante a busca de compostos ativos derivados de plantas como protótipos para novas terapias anticâncer. Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularmente conhecida como "carqueja", é amplamente utilizada na medicina popular para problemas digestivos e hepáticos. Em relação à sua composição química é relatada a presença de flavonas, flavonóis e diterpenos. Os estudos farmacológicos demonstraram diversas atividades como anti-inflamatória e antioxidante. Considerando a importante atividade biológica apresentada por B. trimera, foi realizado um fracionamento bioguiado dessa planta, e seus extratos foram avaliados para a atividade antitumoral. O método analítico desenvolvido por CLAE para a quantificação de rutina e quercetina na fração de compostos fenólicos de B. trimera mostrou ser exato, preciso e específico. A fração de terpenóides e de compostos fenólicos de B. trimera demonstraram um efeito anti-proliferativo dose-dependente nas linhagens celulares SiHa e MCF7 após o tratamento por 24 horas pelo ensaio MTT. Esses resultados foram confirmados pela contagem de células, ensaio clonogênico e teste de wound healing na linhagem SiHa, além da avaliação da atividade da enzima LDH. Esses resultados, tanto quanto sabemos, são relatados pela primeira vez. Com base nesses resultados, pode-se inferir um efeito importante na indução de morte celular de B. trimera em linhagens de células de câncer de mama e de colo do útero. Esses estudos necessitam ser continuados para esclarecer os mecanismos relacionados com a ação farmacológica desses extratos, ajudando na busca de novos protótipos com atividade antitumoral. Partes desta tese foram suprimidas (páginas 27 a 127) em função de não terem sido publicadas.

Breast cancer and cervical cancer are a major public health problem worldwide. Despite the increasing cancer rates and treatment costs, the available drug treatments have variable efficacy, possibility of recurrence and many side effects. Considering the importance of plants as sources of new drugs, it is necessary to search for active compounds derived from plants as prototypes to new anticancer therapies. Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularly known as “carqueja”, is widely used in folk medicine for digestive and liver diseases. In relation to its chemical composition it is reported the presence of flavones, flavonols and diterpenes. Pharmacological studies demonstrated several activities as anti-inflammatory and antioxidant. Considering the potential biological activity of B. trimera it was conducted a bioactivity-guided fractionation of the plant which extracts were evaluated to antitumor activity. The developed HPLC analytical method was accurate, precise and specific to the quantification of rutin and quercetin in B. trimera phenolic fraction. B. trimera crude ethanol extract and the fractions dichloromethane, butanol, ethyl acetate, aqueous terpenoids and phenolic compounds showed an anti-proliferative effect in a dose-dependent in the cell lines SiHa and MCF7 after treatment for 24 hours by MTT assay. These results were confirmed by cell counts, clonogenic assay and wound healing test in the cell line SiHa, moreover activity of the enzyme LDH was measured. These results, as far as we know, are reported for the first time. Based on these results, we demonstrated a significant effect on cell death induction of B. trimera in breast and cervical cancer cell lines. These studies need continuity to understand the mechanisms related to the pharmacological action of these extracts, thus helping in the search for new prototypes with antitumoral activity. Parts of this work were suppressed (pages 27-127) because they have not been published.