Avaliação da atividade antimalárica de compostos semissintéticos

Abstract

A malária é uma doença tropical antiga que continua sendo um dos principais problemas de saúde pública do mundo. Faz-se necessário, assim, desenvolver novas classes de antimaláricos que sejam eficazes e seguros contra a malária. Neste contexto, nosso grupo de pesquisa tem trabalhado, com dois triterpenos semissintéticos derivados dos ácidos ursólico (1) e betulínico (2), os compostos 1c e 2c respectivamente. Estes derivados (1c e 2c) apresentaram elevada potência in vitro frente a cepas de Plasmodium falciparum, alcançaram índices de seletividade em relação à linhagem celular humana satisfatórios e uma rota semissintética convergente foi estabelecida facilitando sua obtenção. Com base nestes resultados e visando dar continuidade a pesquisa, estudos de avaliação da toxicidade in vitro e aguda e da atividade antimalárica in vivo foram propostos como objetivos deste trabalho. Na avaliação da toxicidade in vitro foram realizados ensaios de cito e genotoxicidade frente a linfócitos, ensaios de hemólise e coagulação. Já na análise da toxicidade in vivo, foi realizada a avaliação da toxicidade aguda por meio do protocolo 423 em camundongos BALB/c. A atividade antimalárica in vivo foi avaliada, utilizando o ensaio supressivo de 4 dias em camundongos BALB/c, usando a linhagem de Plasmodium berghei ANKA. Os resultados demonstraram que o derivado 1c apresentou baixa genotoxicidade e efeitos citotóxicos frente a linfócitos. Porém este derivado demonstrou atividade pro-coagulante e hemolítica, com a DL50 aferida entre 300 e 125 mg/kg. Já o derivado 2c demonstrou relativa genotoxicidade e efeitos citotóxicos frente a linfócitos, apresentando também atividade pro-coagulante e hemolítica. A DL50 deste derivado foi aferida entre 300 e 50 mg/kg, sendo classificado como tóxico. A ED50 e o Emax foram calculados a partir dos resultados de parasitemia nos animais tratados apenas para o derivado 1c. A ED50 do derivado 1c foi de 19,68 mg/kg, enquanto que o Emax ficou em 52,18%. A partir destes resultados podemos sugerir que embora apresente sinais de toxicidade em concentrações e doses superiores às efetivas, o derivado 1c possui efetividade e segurança suficiente para que se de seguimento na investigação pré-clínica.

Malaria is an ancient tropical disease that remains a major public health problem in the world. It is necessary, therefore, to develop new classes of antimalarial drugs that are safe and effective against malaria. In this context, our research group has been working with two semisynthetic triterpene derivatives of ursolic (1) and betulinic (2) acids, compounds 1c and 2c respectively. Both derivatives showed high in vitro potency against strains of Plasmodium falciparum, with satisfactory index of selectivity regarding to a human cell line. A convergent semisynthetic route has been established, which facilitates its obtaining. Based on these results and in order to continue the research, this work proposed as objectives to carry evaluation studies on acute toxicity and in vitro and in vivo antimalarial activity. In the assessment of in vitro toxicity, assays against cyto-and genotoxicity lymphocytes were performed, as well as hemolysis and coagulation tests. In the analysis of in vivo toxicity, it was performed the acute toxicity evaluation by means of the protocol 423 in BALB /c mice. The in vivo antimalarial activity was evaluated by using the 4 days suppressive test in BALB / c mice, using a strain of Plasmodium berghei ANKA. The results showed that 1c derivative had low genotoxicity and cytotoxic effects against lymphocytes. However this derivative showed pro-coagulant and hemolytic activities, with LD50 between 300 and 125 mg / kg, at toxic levels. Derivative 2c demonstrated genotoxicity and cytotoxic effects against lymphocytes, also showing pro-coagulant and hemolytic activities. Its LD50 was measured between 300 and 50 mg / kg, being classified as toxic. ED50 and Emax were calculated only from the results of parasitaemia of the animals treated with 1c, being 19,68 mg/kg and 52,18%, respectively. From these results, we suggest that although showing signs of toxicity at concentrations and doses higher than the effective ones, derivative 1c owns enough effectiveness and safety to follow to the pre-clinical investigation.