Análise comparativa entre dois métodos de estimativa da contagem manual de plaquetas em esfregaços de sangue periférico de cães

Abstract

A contagem de plaquetas é uma parte essencial do hemograma que fornece informações para a correta interpretação de diversas enfermidades. A precisão e exatidão dos contadores eletrônicos de células é melhor em comparação com a contagem manual, principalmente porque um número muito maior de células é contado. Mesmo com a existência de técnicas automáticas para contagem de plaquetas cada vez mais sofisticadas, não pode competir com o discernimento humano por critérios morfológicos por causa de interferências que resultam na presença de células ou partículas com tamanhos ou características ópticas semelhantes às das plaquetas, que não podem ser suficientemente discriminados dessas. O contínuo estudo dos métodos de contagem existente e a elaboração de novas metodologias promove um resultado laboratorial mais confiável. O objetivo do estudo foi propor um método de estimativa de plaquetas, denominado de estimativa relativa, na qual as amostras são divididas em diferentes grupos, baseados no valor do hematócrito, comparando com dois tipos de contagem já existente: estimativa em esfregaço sanguíneo, nomeada de estimativa tradicional, e a contagem automatizada por citometria de fluxo pelo Procyte. Foram utilizadas amostras de sangue com EDTA-K2 (Ácido Etilenodiamino tetra-acético) para hemograma de 80 cães de diferentes faixas etárias, raças e condições de saúde. As amostras que continham coágulos, agregados plaquetários, observados na revisão do esfregaço sanguíneo, ou possuíam desproporção na quantidade de anticoagulante foram excluídas do estudo. Essas amostras submeteram-se a contagem automatizada por citometria de fluxo, estimativa plaquetária em esfregaço sanguíneo e a estimativa relativa, na qual houve a classificação em 6 diferentes grupos, baseados no valor de hematócrito. Esses três tipos de contagem foram correlacionados pelos métodos de Passing Block e Bland-Altman. Foi possível observar que a estimativa relativa não apresentou alta correlação com a contagem automatizada. Além disso, não foi observado um viés proporcional durante a comparação do novo método de estimativa proposto e a contagem por citometria de fluxo. Houve uma alta correlação entre a estimativa tradicional e a contagem automatizada. O estudo concluiu que há uma baixa correlação entre o novo método de contagem plaquetária proposto e a contagem automatizada por citometria de fluxo.

Platelet counting is an essential part of the blood count that provides information for the correct interpretation of various diseases. The precision and accuracy of electronic cell counters is better compared to a manual count, mainly a much larger number of cells are counted. Even with the existence of automated techniques for platelet counting that are increasingly sophisticated, it cannot compete with human judgment for morphological criteria because of interferences that result in the presence of cells or particles with cells or optical characteristics parallel to the platelets, which cannot sufficiently discriminated against platelets. The continuous study of the existing counting methods and the development of new methodologies promotes a more reliable laboratory result. The aim of the study was to propose a new method of platelet estimation, called relative estimation, in which the samples are divided into different groups, based on the hematocrit value, comparing with two types of existing count: blood smear estimate, named traditional estimation, and automated flow cytometry counting by Procyte. Blood samples with EDTA-K2 were used for the complete blood count of 80 dogs of different age groups, breeds and health conditions. Samples that contained clots, platelet aggregates, seen in the blood smear review, or had a disproportionate amount of anticoagulant were excluded from the study. These samples were subjected to automated counting by flow cytometry, platelet estimation in blood smear and the relative estimate, in which there was classification in 6 different groups, based on hematocrit. These three types of counting were correlated by the Passing Block and Bland-Altman methods. It was possible to observe that the relative estimate did not show a high correlation with automated counting. In addition, a proportional bias was not observed when comparing the proposed new estimation method and flow cytometry counting. There was a high correlation between traditional estimation and automated counting. The study concluded that there is a low correlation between the proposed new platelet counting method and automated counting by flow cytometry. In addition, the relative estimate took a long time in the opinion of the authors, making this method ineffective in the laboratory routine.