Influência do meio de crescimento na detecção de carbapenemases pelos métodos Carba NP e Blue-Carba

Abstract

Introdução: A detecção rápida de carbapenemases auxilia no tratamento do paciente e medidas de controle de infecção mais eficazes. Duas metodologias fenotípicas rápidas e de baixo custo, Carba NP e Blue-Carba, foram descritas para a detecção dessas enzimas. O objetivo desse trabalho é avaliar a leitura e interpretação desses testes quando realizados a partir de colônias isoladas nos meios MacConkey e Cistina Lactose Deficiente em Eletrólitos (CLED), comparando com os resultados obtidos com crescimento em Mueller-Hinton. Métodos: Um total de 35 isolados produtores de carbapenemases, previamente identificados por RT-PCR multiplex, foram testados para Carba NP e Blue-Carba. Em paralelo realizou-se teste com EDTA para avaliar a presença de metallo--lactamases. Resultados: Nos testes Carba NP os resultados de isolados em MacConkey foram adequados em 57,6 % dos casos quando incubados pelo tempo preconizado e em CLED apenas 22,9 %. Na maioria dos testes Blue-Carba o resultado foi não interpretável; apenas 5 isolados do MacConkey e somente um 1 isolado do CLED forneceram resultados adequados. Discussão: Somente leitura em maior tempo de incubação forneceu resultados satisfatórios para Carba NP. Nos testes Blue-Carba a alteração imediata da coloração dos poços dos controles negativos da maioria dos isolados impediu a interpretação. Acredita-se que esses resultados possam estar associados ao acúmulo de ácido láctico nos isolados lactose positivo. Conclusão: Não recomendamos realizar os testes Carba NP e Blue-Carba com colônias crescidas em MacConkey e CLED tanto pela inadequação do tempo de leitura recomendado no primeiro como pela dificuldade de interpretação no segundo.

Introduction: The rapid detection of carbapenemases improve a more effective treatment of the patient and control infection measures. Two low-cost and quick phenotypic methods, Carba NP and Blue-Carba, has been described in order to detect these enzymes. The present work aims to evaluate the interpretation of these tests when carried out from isolated colonies on MacConkey and Cystine Lactose Electrolyte Deficient agar (CLED), comparing with the results obtained from Muller-Hinton agar. Methods: A total of 35 carbapenemase-producing isolates previously identified through RT-PCR multiplex have been tested for Carba NP and BlueCarba. Simultaneously, tests containing EDTA tests has been performed in order to evaluate the presence of metallo-β-lactamases. Results: The results from MacConkey were suitable in 57.6% of the cases after incubation for the standard period of 2h, whereas only 22.9% were satisfactory from CLED isolates. It was not possible to evaluate the great majority of the results from the Blue-Carba test, only five isolates from MacConkey and one from CLED presented proper results. Discussion: Suitable results were obtained with longer incubation period in Carba NP. In the Blue-Carba tests, the immediate color changing in the negative control well prevented interpretation of the results, and this can be associated with accumulation of lactic acid in lactose positive isolates . Conclusion: We hence do not encourage performing both Carba NP and Blue-Carba tests with colonies from MacConkey and CLED medium, since the first test does not provide a suitable time to obtain the results, as well as the second one faces difficulties regarding interpretation.