http://hdl.handle.net/10183/28 2026-11-15T04:15:21Z 2026-11-15T04:15:21Z Ribeiro, Bárbara Bortolozzo http://hdl.handle.net/10183/308765 2026-06-27T11:03:53Z 2026-01-01T00:00:00Z

Tricomoníase humana e animal : prospecção de compostos a partir de produtos naturais amazônicos e efeito de viridicatum toxina A Ribeiro, Bárbara Bortolozzo A tricomoníase é a infecção sexualmente transmissível não viral mais comum no mundo, causada pelo parasito Trichomonas vaginalis, enquanto Tritrichomonas foetus é o agente etiológico da tricomoníase bovina, que está associada a importantes prejuízos econômicos na pecuária. Em humanos, o tratamento baseia-se exclusivamente nos fármacos da classe dos 5-nitroimidazóis, associados a efeitos adversos e ao aumento de casos de resistência. Em bovinos, não há tratamento aprovado. Nesse contexto, a prospecção de novos compostos bioativos torna-se essencial. Produtos naturais oriundos da biodiversidade amazônica representam uma fonte promissora de moléculas com potencial farmacológico, e os metabólitos secundários de origem fúngica também têm se destacado como candidatos relevantes no desenvolvimento de novos fármacos. Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade anti-T. vaginalis e anti-T. foetus de extratos, frações, óleos e bio-óleos obtidos de plantas amazônicas, bem como caracterizar a atividade anti-T. vaginalis da viridicatum toxina A (VTA). A análise da literatura dos últimos dez anos (2016 – 2026) foi conduzida com o intuito de compilar e analisar criticamente compostos naturais com atividade tricomonicida no âmbito humano e veterinário, destacando classes químicas promissoras e lacunas no conhecimento atual. Os resultados deste trabalho demonstraram que diferentes produtos naturais apresentaram atividade antiparasitária relevante, evidenciando o potencial da biodiversidade amazônica como fonte de compostos bioativos. A VTA destacou-se por apresentar efeito potente anti-T. vaginalis, sendo capaz de induzir a formação de pseudocistos, visualizados na microscopia eletrônica de varredura. Além disso, a avaliação in silico da molécula sugere alta compatibilidade com formulações farmacêuticas para uso tópico. Em conjunto, os resultados desta dissertação ampliam o conhecimento sobre o potencial antiparasitário de produtos naturais amazônicos e de metabólitos fúngicos, contribuindo para a identificação de compostos promissores no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para o tratamento da tricomoníase humana e bovina.; Trichomoniasis is the most common non-viral sexually transmitted infection worldwide, caused by the parasite Trichomonas vaginalis, whereas Tritrichomonas foetus is the etiological agent of bovine trichomoniasis, a disease associated with significant economic losses in livestock production. In humans, treatment relies exclusively on drugs from the 5-nitroimidazole class, which are associated with adverse effects and an increasing number of resistance cases. In cattle, no approved treatment is currently available. In this context, the prospection of new bioactive compounds becomes essential. Natural products derived from Amazonian biodiversity represent a promising source of molecules with pharmacological potential, and fungal secondary metabolites have also emerged as relevant candidates in the development of new drugs. This study aimed to evaluate the anti-T. vaginalis and anti-T. foetus activity of extracts, fractions, oils, and bio-oils obtained from Amazonian plants, as well as to characterize the anti-T. vaginalis activity of viridicatum toxin A (VTA). A literature review covering the last ten years (2016–2026) was conducted in order to compile and critically analyze natural compounds with trichomonicidal activity in both human and veterinary contexts, highlighting promising chemical classes and gaps in current knowledge. The results of this work demonstrated that different natural products exhibited relevant antiparasitic activity, highlighting the potential of Amazonian biodiversity as a source of bioactive compounds. VTA stood out by showing potent anti-T. vaginalis activity and was capable of inducing pseudocyst formation, as observed by scanning electron microscopy. In addition, in silico evaluation of the molecule suggested high compatibility with pharmaceutical formulations for topical application. Taken together, the findings of this dissertation expand the current knowledge regarding the antiparasitic potential of Amazonian natural products and fungal metabolites, contributing to the identification of promising compounds for the development of new therapeutic strategies for the treatment of human and bovine trichomoniasis.

2026-01-01T00:00:00Z Oliveira, Gabriela Simões de http://hdl.handle.net/10183/308751 2026-06-27T11:03:45Z 2026-01-01T00:00:00Z

Evolução genômica da resistência aos antimicrobianos em Escherichia coli : uma perspectiva de saúde única Oliveira, Gabriela Simões de A resistência aos antimicrobianos (RAM) é uma das maiores ameaças à saúde pública, impulsionada pelo amplo uso de antimicrobianos na medicina humana e animal, que favorece a evolução e a emergência de bactérias resistentes. Nesse contexto, a abordagem de Saúde Única é fundamental para compreender a dinâmica da RAM entre os diferentes nichos ecológicos. Devido à sua capacidade de transitar entre diferentes hospedeiros e ambientes, a Escherichia coli tem sido utilizada como biomarcador para vigilância da RAM. A resistência em E. coli ocorre principalmente pela aquisição de genes de resistência por meio da transferência horizontal de genes (HGT) mediada por elementos genéticos móveis (MGEs). Assim, o uso de abordagens baseadas em sequenciamento genômico são essenciais para explorar a evolução molecular da RAM. Logo, o presente estudo teve como objetivo avaliar a evolução genômica da resistência aos antimicrobianos em Escherichia coli de diferentes origens no Sul do Brasil através da análise do resistoma, plasmidoma e pangenoma. Foram utilizados 278 isolados de E. coli obtidos de origem humana (n=104), animal (n=61), alimentar (n=58) e ambiental (n=55). O perfil de suscetibilidade foi determinado através do teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA) e a detecção de genes que codificam beta-lactamases de espectro estendido (ESBLs) e carbapenemases, além daqueles que medeiam resistência às quinolonas e polimixinas, foi realizada por reação em cadeia da polimerase (PCR). A partir destes resultados, 44 isolados de E. coli foram selecionados para realização do sequenciamento completo do genoma através das abordagens de short-reads (Illumina MiSeq) e long-reads (MinIon Oxford Nanopore). Os genomas obtidos foram utilizados para caracterização das cepas, análise do resistoma e plasmidoma, assim como para construção do pangenoma de E. coli. Dos 278 isolados de E. coli, 53,9% apresentaram resistência a pelo menos um dos antibióticos testados e 29,8% foram classificados como multirresistentes (MDR). Os isolados de E. coli sequenciados foram agrupados em 6 grupos filogenéticos, sendo o grupo B1 o mais prevalente. Além disso, também foram caracterizados em 34 STs distintas, sendo as ST131 e ST617 as mais prevalentes. Em relação ao resistoma, foram identificadas 218 mutações cromossômicas associadas à resistência, principalmente a quinolonas, fosfomicina e colistina, além de 534 genes de resistência aos antimicrobianos (ARGs), principalmente relacionados aos beta-lactâmicos, sulfonamidas e tetraciclinas, sendo que 81% dos ARGs estavam associados a plasmídeos. O pangenoma de E. coli foi caracterizado como aberto, composto por 12.247 genes, sendo 2.984 genes classificados como genoma central, 379 como genoma central estendido, 2.305 como genoma acessório e 6.579 pertenciam ao genoma raro. Os resultados deste estudo demonstram a circulação de diferentes cepas de E. coli entre os diferentes nichos ecológicos no Sul do Brasil com amplo resistoma disseminado principalmente através de plasmídeos. Além disso, o pangenoma de E. coli confirmou a elevada plasticidade genética dessa espécie e evidenciou sua constante evolução genômica. Por fim, esses dados ampliam a compreensão sobre a dinâmica genômica da RAM entre os diferentes nichos ecológicos no Sul do Brasil, destacando a importância da vigilância genômica sob a perspectiva de Saúde Única.; Antimicrobial resistance (AMR) is one of the greatest threats to public health, driven by the widespread use of antimicrobials in human and veterinary medicine, which favors the evolution and emergence of resistant bacteria. In this context, the One Health approach is essential to understand the dynamics of AMR across different ecological niches. Due to its ability to circulate among different hosts and environments, Escherichia coli has been used as a biomarker for AMR surveillance. Resistance in E. coli occurs mainly through the acquisition of resistance genes via horizontal gene transfer (HGT) mediated by mobile genetic elements (MGEs). Therefore, the use of genome sequencing–based approaches is essential to explore the molecular evolution of AMR. Thus, the present study aimed to evaluate the genomic evolution of antimicrobial resistance in E. coli from different sources in Southern Brazil through the analysis of the resistome, plasmidome, and pangenome. A total of 278 E. coli isolates were used, obtained from human (n = 104), animal (n = 61), food (n = 58), and environmental (n = 55) sources. The susceptibility profile was determined using the antimicrobial susceptibility test (AST), and the detection of genes encoding extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) and carbapenemases, as well as those mediating resistance to quinolones and polymyxins, was performed by polymerase chain reaction (PCR). Based on these results, 44 E. coli isolates were selected for whole-genome sequencing using both short-read (Illumina MiSeq) and long-read (Oxford Nanopore MinION) approaches. The obtained genomes were used for strain characterization, resistome and plasmidome analysis, as well as for the construction of the E. coli pangenome. Among the 278 E. coli isolates, 53.9% showed resistance to at least one of the tested antibiotics and 29.8% were classified as multidrug-resistant (MDR). The sequenced E. coli isolates were grouped into six phylogenetic groups, with group B1 being the most prevalent. In addition, they were classified into 34 distinct STs, with ST131 and ST617 being the most prevalent. Regarding the resistome, 218 chromosomal mutations associated with resistance were identified, mainly related to quinolones, fosfomycin, and colistin, in addition to 534 antimicrobial resistance genes (ARGs), mainly associated with beta-lactams, sulfonamides, and tetracyclines, of which 81% were associated with plasmids. The E. coli pangenome was characterized as open, comprising 12,247 genes, of which 2,984 were classified as core genome genes, 379 as soft-core genome genes, 2,305 as accessory genome genes, and 6,579 as rare genome genes. The results of this study demonstrate the circulation of different E. coli strains among different ecological niches in Southern Brazil, with a broad resistome disseminated mainly through plasmids. Furthermore, the E. coli pangenome confirmed the high genetic plasticity of this species and highlighted that it is in constant genomic evolution. Finally, these data expand the understanding of the genomic dynamics of AMR across different ecological niches in Southern Brazil, highlighting the importance of genomic surveillance from a One Health perspective.

2026-01-01T00:00:00Z Oliveira, Thayse Viana de http://hdl.handle.net/10183/307250 2026-11-05T11:04:20Z 2025-01-01T00:00:00Z

Abordagens inovadoras da impressão 3D na liberação controlada de moléculas ativas a partir de formulações para aplicação oral ou cutânea Oliveira, Thayse Viana de A impressão 3D tem se destacado na área farmacêutica pela possibilidade de desenvolver formas farmacêuticas personalizadas e com perfis de liberação controlada. Esta tese investigou o uso de técnicas de impressão 3D por extrusão de materiais para produzir formulações orais e cutâneas contendo curcumina e resveratrol, polifenóis com importantes atividades biológicas, mas limitados pela baixa solubilidade e biodisponibilidade. Foram desenvolvidas nanocápsulas poliméricas contendo os ativos e, posteriormente, utilizadas em filmes tópicos por extrusão semissólida com diferentes propriedades. Além disso, imprimidos personalizados contendo resveratrol, isolado ou associado à piperina, foram produzidos por impressão 3D visando melhorar sua biodisponibilidade oral. Os resultados demonstraram que a associação entre nanotecnologia e impressão 3D representa uma estratégia promissora para o desenvolvimento de sistemas farmacêuticos inovadores e personalizados.; 3D printing has gained significant attention in the pharmaceutical field due to its potential to develop personalized dosage forms with controlled drug release profiles. This thesis investigated the use of material extrusion-based 3D printing techniques to produce oral and cutaneous formulations containing curcumin and resveratrol, polyphenols with important biological activities that are limited by their low solubility and bioavailability. Polymeric nanocapsules containing these active compounds were developed and subsequently incorporated into topical films produced by semi-solid extrusion, providing different functional properties. In addition, personalized printlets containing resveratrol, either alone or combined with piperine, were produced by 3D printing in order to improve its oral bioavailability. The results demonstrated that the combination of nanotechnology and 3D printing represents a promising strategy for the development of innovative and personalized pharmaceutical systems.

2025-01-01T00:00:00Z Santos, Francielli Lima dos http://hdl.handle.net/10183/307106 2026-05-21T11:04:21Z 2026-01-01T00:00:00Z

Nanocristais de ativo antifúngico em filme bioadesivo : uma nova abordagem no tratamento das infecções fúngicas de pele e unha Santos, Francielli Lima dos As infecções fúngicas que acometem a pele e as unhas representam um desafio terapêutico devido às barreiras impostas pelo estrato córneo e pela lâmina ungueal, que limitam a penetração de fármacos aplicados topicamente. A nanotecnologia tem sido utilizada com o objetivo de melhorar a disponibilidade e a eficácia terapêutica dos tratamentos contra as infecções fúngicas. O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e a caracterização de nanocristais de clioquinol, bem como a sua incorporação em um filme bioadesivo à base de quitosana, visando ao tratamento tópico de infecções fúngicas cutâneas e ungueais. Inicialmente, os nanocristais de clioquinol foram obtidos por duas metodologias top-down, ultrassonicação com sonda e moagem úmida com esferas, sendo esta última selecionada em função da obtenção de nanocristais com menor tamanho médio de partícula. As formulações obtidas por meio da moagem úmida apresentaram um tamanho médio de partícula em torno de 400 nm, baixo índice de polidispersão (0,250), elevado teor (em torno de 99% em relação a 10 mg/mL), eficiência de nanocristalização (99% em relação a 10 mg/mL), além de estabilidade físico-química quando armazenadas em temperatura ambiente (25°C) por até 90 dias. Estudos in vitro demonstraram que a suspensão de nanocristais de clioquinol apresentou aumento na permeação através da membrana sintética Strat-M®, além de atividade antifúngica pronunciada frente às cepas Trichophyton rubrum e Trichophyton mentagrophytes, evidenciada pela redução expressiva dos valores de concentração inibitória mínima. A incorporação dos nanocristais em filmes bioadesivos de quitosana resultou em um sistema com propriedades mecânicas, pH e adesão adequados para a aplicação tópica. Os filmes contendo nanocristais promoveram maior permeação cutânea e retenção ungueal em estudos in vitro e ex vivo, utilizando pele (cutâneo) e casco (ungueal) de porco, respectivamente. Ademais, os ensaios de atividade antifúngica demonstraram aumento do halo de inibição, ação fungicida mais rápida (Time kill) e ausência de recorrência fúngica no modelo ex vivo de onicomicose, indicando uma atividade antifúngica mais eficaz e sustentada. Dessa forma, os resultados obtidos indicam que a nanocristalização do clioquinol, associada à incorporação em filmes bioadesivos de quitosana, constitui uma abordagem promissora para o tratamento tópico de infecções fúngicas.; Fungal infections affecting the skin and nails represent a therapeutic challenge due to the barriers imposed by the stratum corneum and the nail plate, which limit the penetration of topically applied drugs. Nanotechnology has been employed with the aim of improving the availability and therapeutic efficacy of treatments for fungal infections. The present study aimed to develop and characterize clioquinol nanocrystals, as well as to incorporate them into a chitosan-based bioadhesive film, targeting the topical treatment of cutaneous and ungual fungal infections. Initially, clioquinol nanocrystals were obtained using two top down methodologies, probe ultrasonication and wet bead milling, the latter being selected due to the production of nanocrystals with a smaller mean particle size. The formulations obtained by wet bead milling presented a mean particle size of approximately 400 nm, a low polydispersity index (0.250), high drug content (approximately 99% relative to 10 mg/mL), nanocrystallization efficiency (99% relative to 10 mg/mL), and physicochemical stability when stored at room temperature (25°C) for up to 90 days. In vitro studies demonstrated that the clioquinol nanocrystal suspension exhibited increased permeation across the Strat-M® synthetic membrane, in addition to pronounced antifungal activity against Trichophyton rubrum and Trichophyton mentagrophytes strains, as evidenced by a marked reduction in minimum inhibitory concentration values. The incorporation of nanocrystals into chitosan-based bioadhesive films resulted in a system with mechanical properties, pH, and adhesion suitable for topical application. Films containing nanocrystals promoted greater skin permeation and nail retention in in vitro and ex vivo studies using porcine skin (cutaneous model) and porcine hoof (ungual model), respectively. Furthermore, antifungal activity assays demonstrated an increased inhibition halo, faster fungicidal activity (time-kill), and absence of fungal recurrence in the ex vivo onychomycosis model, indicating a more effective and sustained antifungal activity. Thus, the results obtained indicate that clioquinol nanocrystallization, combined with incorporation into chitosan-based bioadhesive films, represents a promising approach for the topical treatment of fungal infections.

2026-01-01T00:00:00Z